Stoff	Nitrobenzol
Literaturtitel	The Aquatic Toxicity of Organic Compounds to Embryo-Larval Stages of Fish and Amphibians
Organismus	Oncorhynchus mykiss
Habitat	Wasser
Prüfart	Embryo-Larval-Toxizität
Endpunkt	überlebende Juvenile
Standard	-
Dauer Parameter Wert Bezug nominal / analytisch 27  d LC50 = 0,002  mg/l ana Dauer (norm.) Wert (norm.) 27  d LC50 = 2  µg/l ana
Testmedium	Süßwasser
pH	7,9	Temperatur	14,2
Dynamik	durchfluss	Wasserhärte	112,1
Methodenlisting
Zusammenfassung ZUR TESTSUBSTANZ Reinheitsgrad: p.a.. Konzentrationsbestimmung im Testmedium mit  GLC bzw. HPLC (bei c > 1 mg/l). Herstellung der Testlösungen und kontinuierliche Beschickung der Testkammern mit spezieller Durchfluß- Mischeinheit. Lösungsvermittlung mechanisch; entsprechend  dem Lösungsverhalten durch Magnetrührer oder Hochgeschwindigkeitshomogenisation. In den Kammern: Testvolumen: 0,5 l, Volumendurchsatz: 200 ml/h. Durch fortlaufende Durchmischung des Mediums mit Magnetrührern wurde ein stabile Suspension der schwerlöslichen Testchemikalie erreicht. Tägliche Kontrollmessungen.  Getestet wurde eine 6stufige Konzentrationsreihe plus Kontrolle.  Tatsächliche Applikationskonzentrationen (mg/l): 0,001, 0,010, 0,12, 0,36, 0,91, 11,9. ZUM TESTORGANISMUS Durch in vitro Fertilisation erzeugte, frische Embryonen. Alter bei Expositionsbeginn: max 30 min. Eier und Spermien wurden von laichbereiten Fischen durch Abstreifen gewonnen. Herkunft der Eltentiere: versch. Fischzuchten der USA. Zur Befruchtung wurden die Keimzellen für 20 min. gemischt. Größe der Expositions-/Kontrollgruppen: 50 - 125 Individuen je Testkammer.  Der Fortgang der Embyonalentwicklung wurde täglich überprüft,  tote Exemplare wurden entfernt. In den Kontrollen nur unregelmäßiges Auftreten von Defekten; Rate: selten > 1%. ZUM TESTMEDIUM Rekonstituiertes Wasser. Reinheitsgrad verwendeter Salze: p.a.. Alkalinität des Stammediums (als CaCO3): 65,0 mg/l, Osmolarität (Stammedium):  10,8 mOsm/kg H2O. Bedingungen im Test: Temperatur: 14,2 Grad C, Härte (als CaCO3): 112,1 mg/l, Leitfähigkeit: 151,9 µmhos/cm, pH: 7,9, O2-gehalt: 9,8 mg/l. Kontrolle von Temperatur, O2-Gehalt, Härte,  pH-Wert und Leitfähigkeit in regelmäßigen Intervallen. TESTPARAMETER Kriterium für Effekt: Schlupfrate normaler Larven nach ständiger Exposition während des Embryonalstadiums. Als normal wurden Larven ohne grobe Defekte bzw. Mißbildungen definiert. Tiere mit deutlichen Schädigungen wurden aufgrund geringer Überlebenswahrschein-lichkeit als tot gewertet. Der angegebene Wert basiert auf der akkumulierten Anzahl geschädigter oder bis zum Hauptschlupftag abgestorbener Individuen korrigiert um die entstprechenden Daten der Kontrolle. SONSTIGES Durchflußtest. Zur Testkammer: Zur Minimierung von Substanzverlusten über Verdunstung wurden verschlossene, vollständig mit Medium gefüllte  Pyrex-Gefäße eingesetzt, die keine freie Gasphase enthielten. Die Kammern waren mit Edelstahlnetzen horizontal in zwei Kompartimente aufgeteilt von denen das obere die Embryonen, das untere einen magnetgetriebenen Rührstab enthielt. Zulauf des Mediums im Rührkompartiment, Ablauf an der Gefäßdecke.
Memos
Bemerkung	Es wurde die Embryo-Larval-Toxizität von insgesamt 11 Stoffen gegen 2 Fischarten (S. gairdnerii; Pimephales promelas) und 4 Amphibienarten (Ambystoma gracile; Rana pipiens; Rana temporaria;  Xenopus laevis) nach analogen Verfahren geprüft. Je Testdurchgang wurden sowohl die LC50-Werte am Hauptschlupftag  als auch am vierten Tag nach dem Hauptschlupftag bei fortgesetzter  Exposition der Larven bestimmt. Bei 9 Stoffe wurden für den verlängerten  Expositionszeitraum zusätzlich LC10- und LC1-Werte ermittelt.
Sonstige Befunde	Mit steigender Konzentration der Testsubstanz wurden sinkende Larvenschlupfraten bei zunehmender Zahl geschädigter Tiere festgestellt. Bei Applikationskonzentrationen zwischen 0,001 mg/l und 0,12 mg/l zeigten die geschlüpften Larven Schädigungen. Eine Konzentration von 0,36 mg/l führte zur kompletten Mortalität (Schlupfrate: 0%).
Testbonität
2 / UBA-F+E